تهیه cDNA از mRNA ژن OD1 استخراج شده از بافت غدة زهری عقرب ایرانی ادونتوبوتوسدوریه (Odonthobuthus doriae)

نویسندگان

  • امیر جلالی گروه فارماکولوژی و سم شناسی، دانشکده داروسازی، مرکز تحقیقات سم شناسی، دانشگاه جندی شاپور اهواز، ایران.
  • حمید گله داری گروه ژنتیک، دانشکده علوم، دانشگاه شهید چمران اهواز، ایران.
  • فرزانه شاهین گروه ژنتیک، دانشکده علوم پایه، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران.
  • محمد علیمرادی گروه فارماکولوژی و سم شناسی، دانشکده داروسازی، مرکز تحقیقات سم شناسی، دانشگاه جندی شاپور اهواز، ایران.
  • ودیعه بیگی خوزانی استادیار گروه گروه فارماکولوژی و سم شناسی
چکیده مقاله:

زمینه و هدف: در اکثر نقاط ایران، به­ویژه مناطق مرکزی، جنوب و شمال شرقی، عقرب­زدگی یک مشکل بهداشتی جدی محسوب می­شود. بیشتر این گزش ها، ناشی از عقرب‌های خانواده بوتیده (Buthidae Family) می‌باشد. زهر عقرب دارای ترکیبات فعال بیولوژیک مختلف از جمله سموم عصبی (نروتوکسین) می‌باشد که هر کدام توسط ژن مخصوص به خود کد می‌شوند. هدف از انجام این پژوهش تکثیر cDNA کد کنندة یک نروتوکسین شبه آلفا به نام OD1 از غدة زهر عقرب ایرانی ادونتوبوتوس دوریه (Odonthobuthus doriae) می‌باشد. روش بررسی: نمونه های عقرب از آزمایشگاه رفرانس عقرب مؤسسة رازی کرج تهیه و شناسایی شدند. با استفاده از کیت استخراج RNA، مجموع RNA از غدة زهری عقرب استخراج شد. پس از این مرحله، ساخت cDNA از RNA استخراجی انجام شد. به ­منظور تکثیر cDNA کد کنندة  نوروتوکسین، آغازگرهای مناسب طراحی و تهیه شد. پس از بهینه سازی شرایط PCR، و با استفاده از تکنیک نسخه یرداری معکوس (RT-PCR )، قطعة cDNA  کد کننده سم عصبی OD1 با 64 اسید آمینه تکثیر شد. یافته­ ها: با استفاده از کیت­های استخراج و تکنیک RT-PCR، قطعة cDNA  از غدة زهر عقرب ادونتوبوتوس دوریه تکثیر یافت. cDNA به­دست آمده جهت انجام کلونینگ بعدی در نظر گرفته شد.. باند مورد نظر مربوط به ژن OD1 با طول 195 bp بر روی ژل آگارز شناسایی شد.. این باند شامل 264 base pair کد کننده سم عصبی OD1 می باشد..  نتیجه­ گیری: ترتیب اسید آمینه قابل پیش بینی این سم شامل 88 اسید آمینه می باشد که شامل یک سیگنال پپتید با 24 اسید آمینه و سم OD1 کامل با 64 اسید آمینه می باشد.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

Potent modulation of the voltage-gated sodium channel Nav1.7 by OD1, a toxin from the scorpion Odonthobuthus doriae.

Voltage-gated sodium channels are essential for the propagation of action potentials in nociceptive neurons. Nav1.7 is found in peripheral sensory and sympathetic neurons and involved in short-term and inflammatory pain. Nav1.8 and Nav1.3 are major players in nociception and neuropathic pain, respectively. In our effort to identify isoform-specific and high-affinity ligands for these channels, ...

متن کامل

ساخت و تکثیر cDNA از mRNA ژن رمز گردان آنزیم P5CS گیاه Arabidopsis thaliana

گیاهان وقتی در معرض خشکی و شوری قرار می گیرند با تنش اسمزی مواجه می شوند که برای مقابله با تنش اسمزی ایجاد شده تجمع اسمولیتهایی همچون پرولین ، گلیسین بتانین و یا سایر ترکیبات مشابه را افزایش می دهند.در مسیر بیوسنتز این اسمولیتها آنزیمهایی دخالت دارند که بعضی از آنها کلیدی به حساب می‌آیند و با تغییر در تظاهر ژنهایی که این آنزیمها را کد می کنند می توان فراوردة نهایی که اسمولیت مورد نظر می‍‍باشد ...

متن کامل

Effect of Crude Venom of Odonthobuthus doriae Scorpion in Cell Culture using Ion Channel Modulators

Scorpion venom toxicity is one of the major medical concerns from old years, due to its influence on human activities and health. From many years ago a lot of researches established to examine different aspects of venom toxicity and its effects on different organs. During these years researchers are doing more specific studies on the cytotoxicity of scorpion venom. In Iran, Odonthobuthus doriae...

متن کامل

بررسی مولکولی cdnaی کد کننده ی سم مؤثر بر ایزوفرم دوم گیرنده ی ریانودین حاصل از کتابخانه ی cdnaی غده ی زهری عقرب زرد ایرانی odontobuthus doriae

مقدمه: زهر عقرب ها، از پپتیدهای فعال زیستی تشکیل شده است که ارزش پزشکی در کشف دارو دارند. امروزه، بسیاری از مطالعات به آینده ی درمان با ترکیبات زهر عقرب ها بر اساس فعالیت طبیعی که در زهر دارند، اشاره می کنند. یکی از انواع پپتیدهای زهری، سموم مؤثر بر کانال های کلسیمی است که گیرنده های کلسیمی حساس به ریانودین (ryanodine sensitive ca +2 -receptors یا ryrs) را مهار می کنند. فعالیت کنترل نشده ی ایزو...

متن کامل

ساخت و تکثیر cdna از mrna ژن رمز گردان آنزیم p5cs گیاه arabidopsis thaliana

گیاهان وقتی در معرض خشکی و شوری قرار می گیرند با تنش اسمزی مواجه می شوند که برای مقابله با تنش اسمزی ایجاد شده تجمع اسمولیتهایی همچون پرولین ، گلیسین بتانین و یا سایر ترکیبات مشابه را افزایش می دهند.در مسیر بیوسنتز این اسمولیتها آنزیمهایی دخالت دارند که بعضی از آنها کلیدی به حساب می آیند و با تغییر در تظاهر ژنهایی که این آنزیمها را کد می کنند می توان فراوردة نهایی که اسمولیت مورد نظر می‍‍باشد ر...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


عنوان ژورنال

دوره 12  شماره 1

صفحات  33- 40

تاریخ انتشار 2013-03-21

با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023